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          EdU细胞增殖检测试剂盒

          发布时间:2019/8/28 点击次数:6490 来源:US EVERBRIGHT INC.

          一、细胞增殖直接测定DNA合成常用法

          直接测定DNA合成是细胞增殖检测的最准确方法之一,常用检测法有BrdU检测和新型EdU检测。


          BrdU

          EdU

          原理

           BrdU为胸腺嘧啶衍生物,可与胸苷竞争掺入DNA,再用抗BrdU单抗,经ICC染色,显示增殖细胞。

          EdU是一种胸腺嘧啶脱氧核苷类似物,可代替胸苷掺入正在复制的DNA分子中,通过EdU与荧光标记特异性反应快速检测DNA复制活性。

          检测分子

          很小,BrdU抗体的1/500

          检测方式

          免疫反应

          化学反应

          影响其他标记

          DNA变性

          需要

          不需要

          实验时间

          过夜

          2.5h

          检测敏感度

          一般

          灵敏

          植物细胞检测

          需消化细胞壁,细胞壁消化酶常含杂质,甚至破坏细胞形态表征,降低准确性

          无需消化细胞壁即可完成检测,检测便捷准确

          优缺点

          破坏了DNA双链结构,影响了其他染料的结合染色,出现染色弥散,准确性降低

          染料易扩散特异性好,不破坏DNA和核的结构,避免样品损伤,无需抗原抗体反应,可准确反映细胞和组织水平DNA复制活性



          BrdU需DNA变性后才能与抗体结合,导致BrdU、Hoechst染色弥散,边缘模糊不清;EdU边缘清晰完整,检测灵敏准确


          二、EdU检测原理

          EdU(5-ethynyl-2' -deoxyuridine),中文名为5-乙炔基-2' -脱氧尿苷,是一种新型胸苷(胸腺嘧啶脱氧核苷,thymidine)类似物,EdU可以在DNA合成过程中替代胸苷掺入到新合成的DNA中。EdU上的乙炔基能与荧光标记的小分子叠氮化物探针(如YF488/555/594/647)通过一价铜离子的催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,该反应非常迅速,被称作点击反应(Click reaction) 。通过点击反应,新合成的DNA会被相应的荧光探针所标记,运用荧光检测设备(荧光显微镜、流式细胞仪等)检测到增殖的细胞。




          三、EdU检测应用

          细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA修复、病毒复制、细胞标记示踪、线粒体活性、动物活体注射等方面的研究,尤其适合进行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他药物的筛选实验。

          EdU应用

          详情

          动物活体注射实验

          EdU适用于各种动物活体注射,稳定无副作用,检测时间可以从几小时至数十天,也适用于石蜡或冰冻组织切片检测,完全满足动物细胞增殖的检测,是全面分析组织或器官细胞增殖的理想工具。

          植物成像实验

          EdU分子小可透过细胞壁,无需DNA变性和抗原抗体反应,可准确检测植物生长发育分化等性状的细胞增殖情况,其适用于各种单/双子叶植物的细胞增殖检测。

          细胞标记示踪

          标记示踪可直观了解细胞在体内的分布,还可追踪其体内的分化转化及调控机制。EdU能竞争性地渗入正在复制的DNA分子,从而达到标记分裂细胞的目的,简单快速准确示踪细胞,示踪标记时间长达6,远胜于BrdU。

          DNA损伤修复检测

          代谢活动和环境因素如紫外线等能造成人体细胞DNA分子结构的破坏,进而改变细胞阅读信息和基因编码的方式。DNA损伤修复须经常运行,快速改正DNA结构的任何错误。EdU可快速有效标记,细胞核的荧光强度跟DNA损伤修复活性成正相关。

          线粒体活性检测

          线粒体是动物细胞的一种半自主细胞器,具有自身特异的DNA分子。这类环状双链DNA记载了线粒体的遗传信息。采用EdU可以同时标记线粒体DNA,结合APH即可实现针对线粒体DNA复制活性的检测。

          病毒增殖活性检测

          病毒DNA复制是病毒增殖的一个重要表现,采用EdU方法可快速检测病毒DNA的复制活性,并掌握病毒增殖的位点。


          四、EdU检测试剂盒特点

          YF染料标记多种颜色可选择;荧光亮度高;光稳定性好,适合做显微镜检测

          简单仅需三步:EdU孵育,细胞固定化,荧光检测

          快速检测只需2.5 h,大大缩短实验周期

          准确标记率高无需变性,更好地?;は赴翁?/strong>

          兼容允许与多种抗体、荧光蛋白同时标记,可同时检测细胞其他性状特征

          灵敏—YF染料易扩散,单个增殖细胞也可准确检测

          五、实验图

          5.1 显微镜观察

            

                   YF?594 Click-iT EdU                                       hoechst核复染                                            Overlay

          EdU检测试剂盒可以很好的将处于增殖状态的细胞标记出来


          5.2 流式细胞仪

          加羟基脲抑制增殖

          正常细胞增殖

          Hela细胞,10 μM EdU孵育2h。

          YF?594 Click-iT EdU可清楚的分离已结合EdU的增殖细胞与未结合EdU的非增殖细胞

          六、产品目录

           

          货号

          产品名称

          规格

          目录价(RMB

           

          E6032-2mg

          EdU

          2mg

          2500

           

          E6032-10mg

          10mg

          3800

           

          E6032-50mg

          50mg

          5100

          EdU(细胞成像)

          C6015-100T

          YF?488 Click-iT EdU Imaging Kits(绿色荧光)

          100T

          1100

          C6015-500T

          500T

          2200

          C6015-1000T

          1000T

          3600

          C6016-100T

          YF?555 Click-iT EdU Imaging Kits(橙红色荧光)

          100T

          1100

          C6016-500T

          500T

          2200

          C6016-1000T

          1000T

          3600

          C6017-100T

          YF?594 Click-iT EdU Imaging Kits(红色荧光)

          100T

          1100

          C6017-500T

          500T

          2200

          C6017-1000T

          1000T

          3600

          C6018-100T

          YF?647A Click-iT EdU Imaging Kits(远红荧光)

          100T

          1100

          C6018-500T

          500T

          2200

          C6018-1000T

          1000T

          3600

          EdU(细胞流式)

          C6019-20T

          YF?488 Click-iT EdU Flow Cytometry Assay Kits(绿色荧光)

          20T

          1800

          C6019-50T

          50T

          4000

          C6020-20T

          YF?555 Click-iT EdU Flow Cytometry Assay Kits(橙红色荧光)

          20T

          1800

          C6020-50T

          50T

          4000

          C6021-20T

          YF?594 Click-iT EdU Flow Cytometry Assay Kits(红色荧光)

          20T

          1800

          C6021-50T

          50T

          4000

          C6022-20T

          YF?647A Click-iT EdU Flow Cytometry Assay Kits(远红荧光)

          20T

          1800

          C6022-50T

          50T

          4000



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